Amidase (AMD)
Enżimi:Huma katalisti bijoloġiċi makromolekulari, ħafna enzimi huma proteini
Amidase:Ikkatalizza l-idroliżi ta 'diversi amidi alifatiċi u aromatiċi endoġeni u barranin billi tittrasferixxi grupp aċil fl-ilma bil-produzzjoni ta' aċidi ħielsa u ammonja.L-aċidi idrossamiċi u aċidi organiċi oħra jintużaw ħafna bħala mediċini minħabba li huma kostitwenti ta 'fatturi ta' tkabbir, antibijotiċi u inibituri tat-tumur.L-amidases jistgħu jinqasmu f'acylases tat-tip R u tat-tip S skont l-isterjoselettività tal-katalizzatur.
Minbarra li tikkatalizza l-idroliżi tal-amidi, amidase tista 'wkoll tikkatalizza reazzjonijiet ta' trasferiment ta 'acyl fil-preżenza ta' ko-sottostrati bħal hydroxylamine.
Amidase b'sorsi differenti għandhom speċifiċità ta 'sottostrat differenti, uħud minnhom jistgħu biss idrolizza amidi aromatiċi, xi wħud minnhom jistgħu biss idrolizza amidi alifatiċi, u xi idrolizza α-jew ω-amino amidi.Ħafna mill-amini għandhom attività katalitika tajba biss għal amidi aċikliċi jew aromatiċi sempliċi, iżda għal aromatiċi kumplessi, amidi eteroċikliċi, speċjalment amidi b'sostituenti orto, huma ġeneralment baxxi fl-attività (ftit enzimi biss juru effetti katalitiċi aħjar).
Mekkaniżmu katalitiku:
| Enżimi | Kodiċi tal-Prodott | Kodiċi tal-Prodott |
| Trab tal-enżimi | ES-AMD-101 ~ ES-AMD-119 | sett ta '19-il amidases, 50 mg kull 19-il oġġett * 50mg / oġġett, jew kwantità oħra |
| Kit ta' Screening (SynKit) | ES-AMD-1900 | sett ta '19 amidases, 1 mg kull 19-il oġġett * 1mg / oġġett |
★ Speċifiċità għolja tas-sottostrat.
★ Selettività chiral qawwija.
★ Effiċjenza ta 'konverżjoni għolja.
★ Inqas prodotti sekondarji.
★ Kundizzjonijiet ta 'reazzjoni ħafifa.
★ Favur l-ambjent.
➢ L-iskrinjar tal-enżimi għandu jitwettaq għal substrati speċifiċi minħabba l-ispeċifiċità tas-sottostrat, u tikseb enzima li tikkatalizza s-sottostrat fil-mira bl-aħjar effett katalitiku.
➢ Qatt ma tikkuntattja kundizzjonijiet estremi bħal: temperatura għolja, pH għoli/baxx u solvent organiku b'konċentrazzjoni għolja.
➢ Normalment, is-sistema ta 'reazzjoni għandha tinkludi sottostrat, soluzzjoni buffer (L-aħjar pH ta' reazzjoni tal-enzima).Ko-sottostrati bħal hydroxylamine għandhom ikunu preżenza fis-sistema ta ' reazzjoni ta ' trasferiment acyl.
➢ AMD għandu jiġi miżjud l-aħħar fis-sistema ta' reazzjoni b'pH u temperatura ta' reazzjoni ottimali.
➢ It-tipi kollha ta 'AMD għandhom diversi kundizzjonijiet ta' reazzjoni ottimali, għalhekk kull wieħed minnhom għandu jiġi studjat aktar individwalment.
Eżempju 1(1):
Attività ta' idroliżi għal Substrati Amide differenti
| Sottostrat | Attività speċifika μmols min-1mg-1 | Sottostrat | Attività speċifika μmols min-1mg-1 |
| Aċetamide | 3.8 | ο-OH benzamide | 1.4 |
| Propionamide | 3.9 | p-OH benzamide | 1.2 |
| Lactamide | 12.8 | ο-NH2benzamide | 1.0 |
| Butiramide | 11.9 | p-NH2benzamide | 0.8 |
| Isobutyramide | 26.2 | ο-Toluamide | 0.3 |
| Pentanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| Hexanamide | 6.4 | Nikotinamide | 1.7 |
| Cyclohexanamide | 19.5 | Isonicotinamide | 1.8 |
| Akrilamid | 10.2 | Picolinamide | 2.1 |
| Metaacrylamide | 3.5 | 3-Phenylpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3.4 | Indol-3-acetamide | 1.9 |
| Benzamide | 6.8 |
Ir-reazzjoni twettqet f'soluzzjoni buffer tal-fosfat tas-sodju 50mM, pH 7.5, f'70 ℃.
| Amidi | Hydroxylamine | Idrażina |
| Aċetamide | 8.4 | 1.4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramide | 25.0 | 22.7 |
| Benzamide | 9.2 | 6.1 |
Ir-reazzjoni twettqet f'soluzzjoni buffer tal-fosfat tas-sodju 50mM, pH 7.5, f'70 ℃.
Konċentrazzjoni ta 'reaġent relatat: amidi, 100 mM(benzamide, 10 mM);hydroxylamine u hydrazine, 400 mM;enzima 0.9 μM.
Eżempju 2(2):
Eżempju 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Bijokimika tal-Proċess, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Kimika Bioorganika, 2017, Disponibbli onlajn 7.
